当前位置:首页 > 维修方法 > 正文

流式细胞仪维修方法,流式细胞仪维修方法***

大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于流式细胞维修方法问题,于是小编就整理了2个相关介绍流式细胞仪维修方法的解答,让我们一起看看吧。

  1. 怎样利用PI单染色法进行流式细胞仪检测细胞凋亡?
  2. 流式细胞仪检测有个设门法.怎样设门?

怎样利用PI单染色法进行流式细胞仪检测细胞凋亡

利用PI(propidium iodide)单染色法可以检测细胞凋亡。首先,收集待检测的细胞样品,进行细胞固定和穿孔处理。然后,将细胞与含有PI的染色液混合,使PI进入细胞内。PI可以结合到凋亡细胞的DNA上,而无法进入完整的细胞膜。最后,使用流式细胞仪进行检测,通过检测PI的荧光信号,可以区分凋亡细胞和正常细胞。凋亡细胞会显示高荧光信号,而正常细胞则显示低荧光信号。这种方法可以快速、准确地检测细胞凋亡,并在细胞生物学研究和临床诊断中得到广泛应用。

一、基本原理

流式细胞仪维修方法,流式细胞仪维修方法视频
(图片来源网络,侵删)

流式细胞仪检测细胞凋亡:PI单染色法其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等。

二、试剂与仪器

1、PBS溶液

流式细胞仪维修方法,流式细胞仪维修方法视频
(图片来源网络,侵删)

2、PI染液:将PI溶于PBS(pH7.4)中,终浓度为100ug/ml。用棕色瓶4℃避光保存

3、70%乙醇

4、400目筛网

流式细胞仪维修方法,流式细胞仪维修方法视频
(图片来源网络,侵删)

5、流式细胞仪

三、实验步骤

1、收集细胞{数目约(1~ 5)×106个/mL},500~ 1000 r/min离心5min,弃去培养液。

流式细胞仪检测有个设门法.怎样设门?

所谓的门,在流式细胞仪检测的时候术语叫做gate。流式细胞仪是针对细胞(后者颗粒)的群来做研究的。往往是先选中感兴趣的一个细胞群,再分析下一步的染色,可以进行很多分级。

比如先从所有细胞中画出淋巴细胞,可以在FSC-SSC散点图上画出淋巴细胞的群,比如一个方框,或者任意曲线的gate,也就是所谓的门。把淋巴细胞括在内。然后在另外一个散点图上只显示这个gate里的细胞,但是把横坐标和纵坐标改为其他荧光标记。总之,门就是一个选择细胞群的手段。

到此,以上就是小编对于流式细胞仪维修方法的问题就介绍到这了,希望介绍关于流式细胞仪维修方法的2点解答对大家有用。